Set up of a real-time PCR multiplex technique for the simultaneous detection of tuberculous and non-tuberculous mycobacteria in sputum.

Abstract

Le but de notre étude était de mettre au point une technique multiplexe PCR en temps réel pour la détection simultanée des mycobactéries tuberculeuses et des mycobactéries non tuberculeuse dans le crachat. Pour atteindre ce but, une étude transversale pilote a été menée au laboratoire P3 de Tuberculose et des Fièvres Hémorragiques du Centre Universitaire de Recherche Clinique (UCRC). L’étude a porté sur les ADN commerciaux de différentes mycobactéries, des souches de mycobactéries déjà identifiées à l’UCRC et du crachat frais. Ces échantillons ont été traités suivant différentes techniques telles que l’extraction d’ADN, la PCR et la culture des crachats frais. Nous avons observé un taux de détection acceptable des souches de mycobactéries utilisées pour la mise au point (10 CFU/ml) avec une apparition des courbes entre le 20ème et le 30ème cycle de l’amplification. Cette technique de PCR Multiplexe a montré une bonne capacité de détection des mycobactéries à partir des crachats de patients suspects de tuberculose et/ou de mycobactériose (MNT).