| dc.description.abstract | Les protéines recouvrant la surface du mérozoïte du Plasmodium et sécrétées par ses organites apicaux sont considérées comme des candidats vaccins prometteurs pour le paludisme au stade sanguin. La protéine 12 du col de rhoptrie de Plasmodium falciparum (PfRON12) a récemment été signalée comme une protéine spécifiquement exprimée dans les schizontes et localisée dans le col de rhoptrie des mérozoïtes. Dans cette étude, nous avons évalué son potentiel en tant que vaccin candidat. Nous avons exprimé une protéine PfRON12 recombinante par un système sans cellules germinales de blé pour obtenir un anticorps anti-PfRON12. L'analyse immunoblot des lysats de schizontes a détecté une seule bande à environ 40 kDa dans des conditions réductrices, ce qui correspond au poids moléculaire prévu. De plus, l'anticorps anti-PfRON12 a reconnu une seule bande autour de 80 kDa dans des conditions non réductrices, ce qui suggère que le PfRON12 natif forme un multimère à liaison disulfure. L'essai d'immunofluorescence et la microscopie immunoélectronique ont révélé que le PfRON12 était localisé dans le col de mérozoïtes de la rhoptrie des schizontes et à la surface des mérozoïtes libres. L'activité biologique de l'anticorps anti-PfRON12 a été testée par un test in-vitro d'inhibition de la croissance (GIA), et les anticorps de lapin ont inhibé significativement l'invasion des érythrocytes par le mérozoïte. Nous avons ensuite cherché à savoir si PfRON12 est immunogène chez les personnes infectées par P. falciparum. Les sérums de personnes infectées par P. falciparum en Thaïlande et au Mali ont réagi avec le PfRON12 recombinant. De plus, les anticorps humains anti-PfRON12 purifiés par affinité à partir d'échantillons de sérum maliens ont inhibé l'invasion des érythrocytes par le mérozoïte in-vitro. De plus, l'analyse de la réponse anticorps chez des personnes qui n'étaient pas atteintes de paludisme de manière aiguë, mais qui avaient été infectées par le paludisme dans le passé, a révélé que 32 patients (33 %) présentaient une réponse immunitaire IgG contre PfRON12. De plus, le PfRON12 est très bien conservé avec seulement 4 mutations non synonymes dans la séquence codante d'environ 200 isolats déposés dans PlasmoDB. Les taux de cytokines IL-2 et IL-10 étaient significativement plus élevés chez les enfants non infectés par le Plasmodium que chez ceux infectés. La présence d'anticorps naturellement acquis contre cette protéine en l'absence de la maladie suggère que PfRON12 induit une réponse anticorps à long terme. Ces résultats suggèrent que le PfRON12 pourrait être un antigène candidat potentiel au stade sanguin contre P. falciparum. | |
