Evaluation de la qualité des réactifs de coloration pour le diagnostic de la tuberculose par la microscopie à fluo rescence au Mali

Abstract

Introduction : Bien que les techniques de diagnostic moléculaires plus rapides et plus sensibles soient de plus en plus recommandées pour le diagnostic de la tuberculose, la microscopie à la recherche de BAAR demeure l’une des techniques les plus utilisées dans les pays en voie de développement. Elle est la technique la plus accessible pour le suivi des patients sous traitement antituberculeux. La microscopie à fluorescence recommandée par l’OMS est la plus utilisée dans les laboratoires de tuberculose du Mali avec l’option de l’utilisation de colorants préparés localement à partir de poudres déshydratées. Cependant les kits industriels comme le Kit Fluo-RAL constituent une alternative avec une simplicité d’utilisation évitant des préparations parallèles. Objectifs : Evaluer la qualité des réactifs de coloration à fluorescence utilisés dans le réseau des laboratoires de tuberculose au Mali et la performance du kit Fluo RAL pour la recherche de BAAR. Matériels et méthodes : Notre étude transversale s’est déroulée de janvier à décembre 2020 à l’INSP à partir de colorants collectés dans 17 laboratoires de diagnostic de la tuberculose dont 5 sites de préparation de solutions stocks de colorants. En plus de la collecte des colorants, nous avons évalué la préparation et la conservation au niveau des sites de l’étude. Les colorants ont été contrôlés à l’aide de frottis négatifs et positifs à 1+. Le kit Fluo RAL a été comparé aux colorants préparés localement au LNR-TB à partir des panels de paires de frottis négatifs et positifs à différentes charges bacillaires. Résultats : Parmi les dix-sept centres évalués, 35,3% ne possédaient pas de procédures opérationnelles de préparation des colorants, 80% ne respectaient pas toutes les normes de conservation, 59% ne mentionnaient pas le numéro de lot des solutions, 23,5% ne marquaient pas les dates de préparation et de péremption sur les bouteilles et 64,7% ne réalisaient pas le contrôle de qualité interne des colorants. Pour le contrôle de qualité externe des colorants prélevés, les résultats étaient satisfaisants pour les solutions d’auramine à 64,7% et à 88,2% pour les solutions de décoloration et de contre coloration. Les résultats étaient concordants pour l’évaluation du kit Fluo RAL par rapport aux colorants préparés au LNR avec une couleur des BAAR légèrement plus faible pour le kit. En diminuant le temps de décoloration à 1 minute, nous avons obtenu des résultats similaires. Conclusion : Notre étude a montré qu’une attention particulière doit être portée sur la qualité des colorants préparés et utilisés dans le réseau des laboratoires de tuberculose du pays. Le kit Fluo-RAL pourrait être une alternative pour la coloration des frottis surtout dans les laboratoires à charge de travail faible à modérée et ou difficilement accessibles.